怎样简单的介绍原位杂交的概念

大家好，关于怎样简单的介绍原位杂交的概念很多朋友都还不太明白，今天小编就来为大家分享关于原位杂交是什么意思的知识，希望对各位有所帮助！

本文目录

1. 怎样简单的介绍原位杂交的概念
2. 菌落原位杂交法的步骤

原位杂交原位杂交(InSituHybridization,ISH)是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点

①将硝酸纤维素滤膜置于含抗生素的平皿琼脂培养基上，用无菌牙签挑取单菌落种于滤膜和主琼脂平板上，排列成方格栅，膜和板上菌落位置相同。

②培养细菌至产生1-2mm大小的菌落。

③在一块平皿中置4张滤纸，用10%SDS浸透，倒掉多余液体，将带有菌落的滤膜取下轻轻置于滤纸上，菌落面在上，注意防止滤膜底面存有气泡。

④5min后，将滤膜转至用变性溶液（0.5mol/LNaOH,1.5mol/LNaCl）浸湿的滤纸上，放置10min。

⑤将滤膜转至中和溶液（1.5mol/LNaCl,0.5mol/LTris-HCl

pH8.0)浸湿的滤纸上，放置10min，重复中和一次。

⑥将滤膜移至用2×SSPE溶液浸过的滤纸上，放置10min，SSPE配成20×贮备液：3.6mol/LNaCl,0.2mol/L

NaH2PO4(pH7.4)，20mmol/LEDTANa2（pH7.4)。

⑦将滤膜用滤纸吸干，80℃真空烘干2h。

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